Chemiluminescencyjna analiza immunologiczna (CLIA) jest wysoce czułą techniką immunoanalizy.
1. Zasada
Chemiluminescencyjny test immunologiczny łączy swoistość odpowiedzi immunologicznej i wysoką czułość chemiluminescencji. Jego podstawową zasadą jest połączenie swoistej odpowiedzi immunologicznej między antygenem i przeciwciałem z reakcją chemiluminescencji. Konkretnie, antygen w próbce, która ma być przetestowana, łączy się ze swoistym przeciwciałem, tworząc kompleks immunologiczny. Następnie, poprzez szereg reakcji chemicznych, kompleks immunologiczny wytwarza sygnał chemiluminescencyjny. Intensywność luminescencji jest proporcjonalna do stężenia testowanego antygenu, a zawartość testowanego antygenu można ilościowo przeanalizować, wykrywając intensywność luminescencji.
2. Główne składniki
Przeciwciała: w tym przeciwciała wychwytujące i przeciwciała wykrywające. Przeciwciało wychwytujące jest zwykle utrwalane na nośniku fazy stałej w celu wychwycenia antygenu, który ma zostać przetestowany. Przeciwciało wykrywające jest łączone z markerem chemiluminescencyjnym w celu wykrycia antygenu w kompleksie immunologicznym.
Nośniki fazy stałej: takie jak mikropłytki, kulki magnetyczne itp., stosowane do utrwalania przeciwciał wychwytujących w celu ułatwienia reakcji immunologicznej, a także ich separacji i płukania.
Marker chemiluminescencyjny: zwykle substancja, która może wytwarzać sygnał luminescencyjny w reakcji chemicznej, np. luminol, ester akrydyny itp. Marker łączy się z przeciwciałem wykrywającym, aby wytworzyć sygnał chemiluminescencyjny po reakcji immunologicznej.
System detekcji: obejmujący urządzenia takie jak detektory luminescencji, które służą do wykrywania intensywności sygnałów chemiluminescencyjnych i przekształcania ich na wartości możliwe do odczytania.
3. Funkcje
Wysoka czułość: umożliwia wykrywanie niezwykle niskich stężeń substancji testowej, co zazwyczaj zapewnia o kilka rzędów wielkości większą czułość niż tradycyjne metody immunoanalizy.
Szeroki zakres liniowy: Zawartość substancji testowej można dokładnie zmierzyć w szerokim zakresie stężeń bez konieczności wielokrotnego rozcieńczania.
Wysoka specyficzność: Na podstawie specyficznego wiązania antygenu i przeciwciała, jest wysoce selektywny w stosunku do określonych substancji testowych.
Szybkość: Proces wykrywania jest stosunkowo szybki, a wyniki można zazwyczaj uzyskać w krótszym czasie.
Wysoki stopień automatyzacji: Nadaje się do wykrywania próbek na dużą skalę i może być stosowany w połączeniu z automatycznymi instrumentami w celu zwiększenia efektywności wykrywania.
4. Obszary zastosowań
Diagnostyka kliniczna: Służy do wykrywania różnych biomarkerów, takich jak markery nowotworowe, hormony, markery chorób zakaźnych itp., co stanowi ważną podstawę do diagnozy choroby, monitorowania leczenia i oceny rokowania.
Rozwój leków: Stosowany do monitorowania stężenia leku, oceny skuteczności i badań nad metabolizmem leków.
Badania bezpieczeństwa żywności: wykrywanie szkodliwych substancji, pozostałości pestycydów, pozostałości leków weterynaryjnych itp. w żywności.
Monitoring środowiska: wykrywanie zanieczyszczeń i substancji toksycznych w środowisku.